蛋白纯化注意事项

1.  选择表达载体时，要根据所表达蛋白的最终应用考虑。如为方便纯化，可选择融合表达；如为获得天然蛋白，可选择非融合表达。

 

2.  融合表达时在选择外源DNA同载体分子连接反应时，对转录和转译过程中密码结构的阅读不能发生干扰。

3.  菌液OD值要小于1，否则细胞太浓太老，不易破碎，且质粒易丢失。

4.  诱导时间最好做一个梯度，不同蛋白诱导时间需摸索。

5.  诱导温度适当摸索：25、30℃。

6.  IPTG浓度：一般在1 mM 以内，可适当摸索。

7.  超声条件可视实际情况改变，只要使菌体裂解充分即可，即菌液清亮不粘稠。